Influência da somatotropina recombinante bovina no desenvolvimento folicular e na coleta de embriões em éguas / Influence of bovine recombinant somatotropin in the follicular development and embryo colletion in mares

Dez éguas, sem raça definida, foram submetidas a avaliações ultrassonográficas durante o intervalo interovulatório, avaliando-se folículos ≥ 5mm. Cinco éguas foram tratadas com 500mg de r-bST no primeiro e no 14º dia pós-ovulação (grupo GT), e as demais com soro fisiológico (grupo GC). Quando o folículo dominante atingiu diâmetro ≥ 40mm, foram induzidas com hCG e inseminadas 24 horas após, sendo submetidas à coleta de embrião seis dias após a ovulação. Os dados foram agrupados de acordo com o diâmetro do folículo dominante nas fases de emergência, divergência, dominância, pré-ovulatória, indução, inseminação e ovulação. Todas as éguas foram usadas duas vezes, no mesmo grupo. O GT apresentou crescimento folicular precoce para as fases de emergência, divergência, dominância e pré-ovulatória, assim como para o seu maior folículo subordinado, que cresceu mais cedo. As taxas de recuperação foram de 90% (GC) e 70% (GT), em 16 estruturas coletadas, obtendo-se uma não fecundada e um blastocisto inicial para o grupo GC; os demais, no estágio de mórula, apresentaram comportamento semelhante entre os grupos. Conclui-se que a r-bST influencia a dinâmica folicular de éguas, levando a uma antecipação do desenvolvimento folicular, que pode ser utilizada para encurtar o ciclo estral.(AU)

Ten undefined mare breeds were submitted to ultrasonographic evaluations during the interovulatory interval, evaluating follicles measuring ≥ 5mm. Five mares were treated with 500mg r-bST on the first and the 14th day after ovulation (TG group), and the others with saline (CG group). When the dominant follicle reached a diameter ≥ 40mm the ovulation was induced with hCG, and the mares were inseminated 24 hours later and submitted to embryo collection six days after ovulation. The data were grouped according to the diameter of the dominant follicle in the emergence, divergence, dominance, preovulatory, induction, insemination and ovulation phases. All mares were used twice, in the same group. The GT showed early follicular growth for the emergence, divergence, dominance and pre-ovulatory phases, as well as for its greater subordinate follicle, growing earlier. The recovery rates were 90% (CG) and 70% (TG), and 16 structures were collected, obtaining an unfertilized embryo and an initial blastocyst for the CG group, the others in the morula stage behaved similarly between the groups. It can be concluded that r-bST influences the follicular dynamics of the mares, leading to an anticipation of the follicular development that can be used to shorten the estrous cycle.(AU)

Morfometria e população de folículos pré-antrais de vacas Nelore vazias, gestantes e de fetos nos terços inicial, médio e final da gestação / Morphometry and population of preantral follicles of not pregnant Nelore cows, pregnant and fetus in the initial, medium and final third of pregnancy

The aim of this study was to describe population and morphological characteristics of preantral follicles of not pregnant cows, pregnant cows and fetus. Ten ovaries of non-pregnant Nelore cows, eighteen ovaries of pregnant cows and eighteen ovaries of fetus were used. For pregnant cows, six ovaries from each third (initial, middle and final) were evaluated, acquired from a slaughterhouse. For fetus, the same methodology and proportion of ovaries were used. Ovaries were washed, fixed and embedded in paraffin. They were then sectioned in longitudinal sections and stained by the Hematoxylin-Eosin method. Preantral follicles were classified according to morphology (primordial, primary and secondary) and degree of viability (intact and in initial, moderate and marked atresia). Descriptive and statistical analyzes were performed through KS300 image analysis program and Tukey's test. A greater proportion of primordial follicles were found in all categories. Secondary follicles were not observed in ovaries of fetus and cows in the initial third of pregnancy. All the ovary dimensions were higher in non-pregnant cows and in the final third of cows' pregnancy, and lower in final third of pregnancy fetus. It was concluded that follicle isolation was effective in describing population and morphological characteristics of preantral follicles of cows and fetus.(AU)

Follicular and luteal morphometry, progesterone concentration and early gestation in Holstein cows (Bos Taurus) at high altitude in the tropics (Colombia) / Morfometría folicular y luteal, concentración de progesterona y éxito de la gestación en vacas Holstein (Bos Taurus) en el trópico alto (Colombia)

Abstract Objectives. The aim of this study is to evaluate the relationship among ovulatory follicle (OF) size, corpus luteum (CL) volume, and progesterone (P4) serum levels with pregnancy success. Materials and methods. Nineteen Holstein cows located in Bogotá, Colombia with a history of 2 to 6 previous calving were used in the study. Following 40 day postpartum, two consecutive phases were evaluated as follows: 1) estrous cycle; 2) early pregnancy or return to estrus after Artificial Insemination (AI). Ultrasound exam was performed twice daily after first sign of estrus to evaluate OF diameter and CL volume, and serum P4 levels were evaluated on days 6, 9, 12 and 15 after ovulation. Cows were inseminated 12 hours post estrus signs and pregnancy was diagnosed 30 days post AI. Results. 47.36% of the cows were diagnosed as pregnant after AI. Pregnant cows had smaller OF diameters (17.85±2.39 mm) than non-pregnant females (21.10±2.86 mm) (p<0.05). Cows with smaller OF were more likely to become pregnant (OR=0.624, IC=95% (0.4-0.9) (p<0.05). There were non significant differences in the CL volume (p=0.10) and P4 serum values (p=0.39) between pregnant and no pregnant cows on days 6, 9, 12 and 15 post ovulation. Serum P4 levels were not correlated to CL size and reproductive status. Conclusions. This study shows that there was not significant difference in serum P4 levels and the CL volume when comparing pregnant with non-pregnant cows. A relationship was found between the OF diameter and the CL volume. Small OF diameter was a factor associated with early pregnancy.

Resumen Objetivo. Evaluar la relación entre el diámetro del folículo ovulatorio (FO), el volumen del cuerpo lúteo (CL), los niveles séricos de progesterona (P4) con el éxito de la gestación. Materiales y métodos. En 19 vacas Holstein que habían tenido 2 a 6 partos ubicadas en Bogotá, se evaluaron dos fases consecutivas a partir del día 40 postparto, la primera correspondió al ciclo estral y la segunda correspondió a la gestación temprana o repetición de celo. En cada fase se detectó el celo, se realizó ultrasonografía para evaluar el diámetro del FO, confirmar ovulación, y el volumen del CL los días 6, 9, 12 y 15; en estos días también se evaluó los niveles séricos de P4. En la segunda fase se realizó inseminación artificial (IA) y se diagnosticó la gestación 30 días post-IA. Resultados. El 47.36% de las vacas se diagnosticaron como gestantes y el 52.63% como no gestantes. Las gestantes presentaron diámetros de FO menores 17.85±2.39 mm al de las no gestantes (21.10±2.86 mm; p<0.05). Las vacas que presentaron diámetros de FO más pequeños tuvieron mayor posibilidad de quedar gestantes (OR=0.624, IC=95% (0.4-0.9) (p<0.05). Los animales gestantes y no gestantes presentaron similares volúmenes de CL (p=0.10) y niveles séricos de P4 (p=0.39) los días 6, 9, 12 y 15. Conclusiones. No hubo diferencias en los niveles séricos de p4 y el volúmen del CL. Vacas con FO de menor diámetro tuvieron mayor probabilidad de gestación. Otras variables como CL y niveles de P4 no fueron predictivos del éxito de la gestación.

Development of fixed-time artificial insemination protocols for locally adapted Curraleiro Pé-Duro cows / Desenvolvimento de protocolos de inseminação artificial em tempo fixo em vacas da raça localmente adaptada Curraleiro Pé-Duro

Two experiments were conducted aiming to evaluate the effects of two ovulatory inducers (Exp.1) and equine chorionic gonadotropin (eCG; Exp.2) on follicular and luteal dynamics in a fixed-time AI (FTAI) protocol in locally adapted Curraleiro Pé-Duro cows. In Exp. 1 multiparous cows (n=12) received an intravaginal device containing 1g of progesterone (P4) for 8 days and 2mg of estradiol benzoate (EB) intramuscularly (IM) at device insertion (Day 0). At device removal (Day 8) 0.150mg of Sodium D-Cloprostenol was administered IM and the cows were randomly assigned to receive 1mg of EB (EB8) or 1mg of estradiol cypionate (EC8) IM, or to not receive any ovulatory inducer (Control). All the animals participated in all treatments (crossover). The interval from P4 removal to ovulation was shorter and less variable in the EB8 treatment group (P≤0.05). In Exp. 2 (crossover), multiparous cows (n=12) received the same hormonal treatment as the EB8 group in Exp.1. At device removal (Day 8) cows were randomly assigned to receive 300UI of eCG IM or to not receive eCG (Control). No difference was ascertained on follicular and luteal parameters in Exp. 2 (P>0.05). We concluded that EB can be used as the ovulatory inducer (Exp. 1) in a FTAI protocol in Curraleiro Pé-Duro cows. However, eCG (Exp. 2) was not able to stimulate follicular and luteal development. This result is probably due to the adaptive capacity of Curraleiro Pé-Duro cows that maintained a satisfactory body condition score even in dry and hot environments.(AU)

Foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar o efeito de dois indutores da ovulação e da gonadotrofina coriônica equina (eCG) na dinâmica folicular e luteal, em um protocolo de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) em vacas localmente adaptadas da raça Curraleiro Pé-Duro. No experimento 1, vacas pluríparas receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de progesterona (P4) durante oito dias e 2mg de benzoato de estradiol (BE) intramuscular (IM) no momento da inserção do dispositivo (dia zero). Na retirada do dispositivo (dia oito), as vacas receberam 0,150mg de D-cloprostenol sódico IM e foram separadas aleatoriamente para receber 1mg de BE IM (BE8) ou 1mg de cipionato de estradiol IM (CE8), ou nenhum indutor da ovulação (controle). Todos os animais participaram de todos os tratamentos (crossover). O intervalo entre a retirada da P4 e a ovulação foi menor e menos variável no tratamento BE8 (P≤0,05). O momento da ovulação foi mais precoce e mais concentrado nos animais do grupo BE 8. No experimento 2 (crossover), vacas pluríparas receberam o mesmo tratamento hormonal do grupo BE8 do experimento1. Na retirada do dispositivo (dia 8), as vacas foram separadas aleatoriamente para receberem 300UI de eCG IM, enquanto o controle não. Não houve diferença nos parâmetros foliculares e luteais avaliados no experimento 2 (P>0,05). Em conclusão, o BE pode ser utilizado como indutor da ovulação (experimento 1) em protocolos de IATF em vacas Curraleiras Pé-Duro. Entretanto, o eCG (experimento 2) não foi capaz de estimular o desenvolvimento folicular e luteal. Esse resultado é devido provavelmente à capacidade adaptativa das vacas Curraleiras Pé-Duro em manter uma condição corporal satisfatória mesmo em condições de clima seco e quente.(AU)

Atividade ovariana de vacas leiteiras em dietas com propilenoglicol ou monensina no período de transição / Ovarian activity of dairy cows receiving diets with propylene glycol or monensin during the transition period

Avaliou-se o efeito da adição de propilenoglicol ou de monensina na dieta de vacas leiteiras no período de transição sobre o retorno à atividade ovariana cíclica. Foram utilizadas 42 vacas pluríparas, da raça Holandesa, com produção de leite semelhante na lactação anterior (média de 8.000kg). Os animais, distribuídos em um delineamento inteiramente ao acaso, foram divididos em grupos que receberam dieta-controle e dietas acrescidas com 300ml de propilenoglicol ou 30ppm da matéria seca da dieta/dia de monensina. Avaliaram-se os ovários, por ultra-sonografia, entre os dias quatro e 46 pós-parto, e a concentração plasmática de progesterona, nos dias 10, 20, 25, 30, 35, 40 e 45 pós-parto. A adição de propilenoglicol mostrou-se eficiente em acelerar o retorno à ciclicidade após o parto. Os animais dos grupos que receberam propilenoglicol só no pré-parto, ou no pós-parto e no período de transição apresentaram intervalos parto-primeira ovulação de 29,0, 44,0 e 27,2 dias, respectivamente. Os intervalos parto-concepção para esses mesmos grupos foram de 98,3, 90,8, e 100,0 dias. A adição de monensina não se mostrou eficiente em acelerar o retorno à atividade ovariana cíclica após o parto. As vacas dos grupos que receberam monensina só no pré-parto, ou pós-parto, ou no período de transição apresentaram intervalos parto-primeira ovulação de 43,6, 39,3 e 42,8 dias, respectivamente. Os intervalos parto-concepção para os grupos pré e pós parto foram de 173,2, e 126,1 dias, respectivamente.

The influence of the addition of propylene glycol or monensin to diets of dairy cows during the transition period on return to ovarian cyclicity was evaluated. Forty two multiparous Holstein cows with an average milk production of 8,000kg were distributed in a split-plot design and were divided into groups receiving either control diets or diets increased with 30ppm of monensin or 300ml of propylene glycol during the transition period. Ovaries were evaluated by ultrasonography between days 4 and 46 post-partum. On days 10, 20, 25, 30, 35, 40, and 45 post-partum, blood samples were taken to assay progesterone. The addition of propylene glycol showed to be more efficient in accelerate the return to cyclic ovarian activity. Cows that received propylene glycol just during pre-partum, post-partum or during the hole transition period showed intervals from parturition to first ovulation of 29.0, 44.0 and 27.2 days, respectively. The intervals from parturition to conception for the same groups were 98.3, 90.8, and 100.0 days, respectively. The addition of monensin to diets did not show positive effects on post-partum return to ovarian cyclicity. Cows that received monensin just during pre-partum, post-partum or during the hole transition period showed intervals from parturition to first ovulation of 43.6, 39.3, and 42.8 days, respectively. The interval from parturition to conception for cows that received monensin pre and post-partum were 173.2 and 126.1 days, respectively.

Efeitos da progesterona exógena sobre o desenvolvimento folicular em ovelhas / Effects of exogen progesterone on follicular development in sheep

Avaliaram-se os efeitos da progesterona (P4) sobre o crescimento folicular e na endocrinologia reprodutiva em ovelhas Bergamácia. Quatorze ovelhas sincronizadas com prostaglandinas (PGF2alfa ) foram distribuídas em dois grupos (n=7/grupo): grupo-controle e grupo tratado com progesterona (CIDR) depois da ovulação (dia zero). Desde o dia anterior à aplicação de PG até o dia 10, realizaram-se monitoramentos ultra-sonográficos para estabelecer o crescimento folicular. Amostras de sangue foram colhidas para a determinação de P4 desde o dia anterior à aplicação de PG até o dia 10 depois da ovulação. Para o perfil dos pulsos de hormônio luteinizante (LH), as colheitas de sangue ocorreram em intervalos de 30 minutos por um período de oito horas, nos dias um e seis. As taxas de crescimento diferiram (P<0,001) entre os grupos, 0,91±0,15 e 0,70±0,16mm/dia para os grupos controle e tratado, respectivamente. Os dias do platô dos animais controle e tratados foram de 1,9±0,72 e 2,9±0,45 (P<0,05), respectivamente. As concentrações médias de progesterona (P<0,001) foram diferentes entre os tratamentos. A freqüência dos pulsos diferiu no primeiro dia do ciclo (P<0,01), com valores de 2,55±0,09 pulsos/8 horas no grupo-controle e de 1,49±0,11 pulsos/8 horas no grupo tratado. No sexto dia, o grupo-controle 2,20±0,09 pulsos/8 horas apresentou maior número de pulsos (P<0,05) que o grupo tratado, 1,22±0,11 pulsos/8 horas. Os efeitos inibitórios da progesterona exógena no diâmetro do folículo dominante foram mediados pela redução na freqüência dos pulsos de LH.

The effects of progesterone (P4) on ovarian follicular growth and reproductive endocrinology were studied. Fourteen ewes, synchronized using prostaglandin (PGF2alpha ), were randomly divided in two groups (n=7/group); control group and progesterone-treated group (CIDR) after ovulation (day zero). From one day before PG injection until day 10, daily ultrasonic examinations were done to establish follicular growth. Blood samples for P4 plasma concentration determinations were collected from one day before PG until day 10 post-ovulation. For profile of LH pulses, blood samples were collected at 30-min intervals for a period of 8h on days one and six. The growth rate was different between groups (P<0.001), being 0.91±0.15 and 0.70±0.16mm/d for control and treated-group, respectively. The lengthened of the static phase for control and treated group were 1.9±0.72 and 2.9±0.45d (P<0.05), respectively. Mean concentrations of P4 (P<0.001) were different between treatments. Differences in LH pulse frequency on day one (P<0.01) were observed with values of 2.55±0.09 pulses/8 h in control group and 1.49±0.11 pulses/8h in treated-group. On day six, control group showed higher values for LH pulse frequency (2.20±0.09 pulses/8h) than treated-group (P<0.05), (1.22±0.11 pulses/8h). In conclusion, the inhibitory effects of exogen P4 on the diameter of dominant follicle was mediated by reduced LH pulse frequency.

Regressão luteal e dinâmica folicular após luteólise natural ou induzida por cloprostenol em vacas da raça Gir

The luteal regression and the follicular dynamic were evaluated during the natural luteal regression period (n=14) or after induction of luteolysis by the administration of 500 g of cloprostenol (n=13), using a portable ultrasound device. Luteolysis induction increased luteal regression over 24 (0.89±0.13×0.24±0.17cm²/day; P 0.05) and 48 hours period (0.78±0.15×0.36±0.07cm²/day; P 0.05), but the reduction of progesterone concentration was similar (P>0.05). There was no difference (P>0.05) in follicular dynamic between the two groups. Cows in which the largest follicle during luteolysis was the ovulatory follicle presented shorter periods of follicular growth (3.71±0.56×5.26±0.34 days; P 0.05) and luteolysis to estrous intervals (85.71±14.68×121.33±8.34 hours; P 0.05). This study shows that functional (but not morphological) regression of corpus luteum and follicular dynamics after spontaneous or induced luteolysis are similar in Gir cattle.

A regressão luteal e a dinâmica folicular foram avaliadas durante o período de regressão luteal natural (n=14) ou após a indução artificial da luteólise pela aplicação de 500 g de cloprostenol (n=13), utilizando-se um aparelho portátil de ultra-som. Após a indução da luteólise foi detectada maior taxa de regressão luteal em 24 (0,89± 0,13×0,24± 0,17cm²/dia; P 0,05) e 48 horas (0,78±0,15×0,36±0,07cm²/dia P 0,05), porém a redução na concentração de progesterona foi semelhante (P>0,05). Não houve diferença (P>0,05) nas características da dinâmica folicular entre os dois grupos. No momento da luteólise, quando havia um folículo dominante funcional, observou-se redução na duração do crescimento folicular (3,71±0,56×5,26±0,34 dias; P 0,05) e no intervalo luteólise-estro (85,71±14,68×121,33±8,34 horas; P 0,05). Os resultados demonstram que a regressão funcional do corpo lúteo e a dinâmica folicular são semelhantes após a luteólise natural ou induzida em vacas da raça Gir, e que o fator determinante no intervalo luteólise-estro é o estádio fisiológico dos folículos presentes.